顶级心血管杂志CirculationWe [复制链接]

最新一期顶级心血管杂志Circulation（IF=18.88）发表了哈佛大学医学院心脏病学，哈佛大学干细胞研究中心科学家的最新结果：GeneTherapyforCatecholaminergicPolymorphicVentricularTachycardiabyInhibitionofCa2+/Calmodulin-DependentKinaseII。

研究背景及摘要

背景：

儿茶酚胺敏感性室性心动过速(CPVT)是一种以肾上腺素性心律失常为特征的遗传性心律失常，目前的治疗标准尚不完善。CA2+/钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ(CaMKII)是一种肾上腺素激活的激酶，参与心脏疾病模型心律失常的发生，是CPVT的候选治疗靶点。然而，CaMKII抑制的翻译一直受到心肌细胞选择性CaMKII抑制的限制。在这里，作者验证了这样的假设：心肌细胞靶向基因治疗策略可以抑制CPVT小鼠模型中的心律失常。

方法：作者研制了一种腺相关病*载体AAV9-GFP-AIP，将其与GFP融合，从心肌细胞选择性启动子中表达。载体是系统地传递的。采用侵入性电生理试验对成年小鼠心律失常负荷进行评估。AIP还在CPVT患者不同致病突变的诱导多能干细胞(IPSC)上进行了检测，以确定我们建议的治疗方法对人iPSC衍生心肌细胞(iPSC-CMS)和不同致病基因型的治疗效果。

结果：AAV9-GFP-AIP在心脏中呈阳性表达，在心脏外组织(包括脑组织)中无明显表达.给已知CPVT突变(RYR2RQ/)的新生小鼠注射AAV9-GFP-AIP能有效抑制β-肾上腺素能刺激或程序化心室起搏所致的室性心律失常，无明显的促心律失常作用。将AAV9-GFP-AIP血管内注射至青春期小鼠，可转染约50%的心肌细胞，对CPVT小鼠的心律失常有明显的抑制作用。来自两种不同致病突变的CPVT患者的iPSC-CMS显示出异常钙释放事件的频率增加，这种异常释放事件被一种细胞透性形式的AIP所抑制。

结论：AAV介导的CaMKII肽抑制剂对CPVT小鼠的心律失常有明显的抑制作用。CaMKII抑制还可逆转不同致病突变的人CPVT、iPSC-CMS模型的心律失常表型.

主要结果

SchematicdepictingAAVvectorandoverallexperimentaldesign

AAV9-GFP-AIPsuppressesventriculararrhythmiasinRyr2RQ/+mice

AAV9-GFP-AIPtreatmenteffectivelysuppressesventriculararrhythmiasinadolescentCPVTanimals

本文中重要机制研究：抑制Ca2+/Calmodulin-DependentKinaseII激酶活性，可通过激酶底物phospholamban（PLN）蛋白质磷酸化抑制程度进行检测。

PLN为小分子量蛋白质（约5KD），稳定检测难度大。故作者选择Wes全自动定量蛋白质分析系统进行研究。

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